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广州坤和生殖中心实验室培养液详解

    广州坤和生殖中心实验室是国内仅有的几家大规模实验室之一,其中培养液是实验室最常用也是最为重要的消耗品之一,培养液的稳定性,直接决定着配子、胚胎的培养结局。但是,在培养液商品化的时代,培养液的获得变得简单且效果相对稳定,因此往往忽视其使用、存储等环节的重要性。今天广州代孕网小编就给大家做下简单的介绍。


广州坤和生殖中心实验室培养液详解


  培养液的存储目的是为了使培养液在使用过程中不因存储条件等原因而影响试剂的应有性能。比如培养液中的碳酸氢钠在培养液中充当pH调解作用,在受热条件下会加速分解成H20和C02(2HCO3 CO32 H20 C02), 从而使培养液呈碱性,同时碱性溶液中的OH-与培养液中的重要成分硫酸镁反应形成沉淀物 (MgS04+20H- = Mg(OH) 2+S042-),碱性环境同样能使青—链霉素加速分解;L—谷氨酰胺在37℃条件下能在1-2周内完全降解形成铵,铵能够阻止胚胎发育,且一定水平的铵浓度甚至会影响胎儿生长速度,使胎儿体格变小。培养基在存储过程中为了要避免微生物污染的风险,除了对开封的培养液进行封口处理外,同时要求存储环境不利于微生物生长,微生物只能在一定的温度范围内生存、发育和繁殖,这个温度范围的下限温度被称为生物零度。在这个温度之下,微生物呈抑制生长状态,但不是全部死亡。对一般常见的微生物,病原菌等在1 0℃以下发育就被显著抑制了。因此,培养液一般要求存储温晶度为2-8℃。低温环境同样可以延缓溶液中水的挥发作用,避免溶液渗透压异常升高,渗透压在胚胎早期发育至关重要,特别在卵母细胞期及早卵裂期对渗透压的变化尤为敏感。’但是,如果存放温度过低,一些成分的溶解度会随着温度的降低而下降,导致结晶等沉淀物的产生。但是…些热稳定性差的试剂,如透明质酸酶等要求存储温屐度必须处于冷冻条件下。


  目前使用的商品化培养液是含有多种无机物、氨基酸成分的复合培养液。为了达到培养基最佳的使用效果,在考虑存储时往往达不到每个成分最稳定状态的存储条件。因此,在存放试剂时,一些成分仍然处于不稳定的缓慢分解状态,如培养液中常添加的抗生素青霉素和链霉素(俗称双抗)在水溶液中极不稳定,且随着时间的延迟,分解越多。


  在日常的实验室工作中,对子们一般考虑:①存储环境不改变培养液的性质;②存储过程使细菌污染风险降到最低;③存放次序合理,取用方便。


  在确定使用某一商品化的试剂前,广州坤和生殖中心首先了解该培养液每类商品的名称、存储和使用要求。比如对培养箱C02浓度的要求,各类试剂因其缓冲离子浓度不同,为达到培养要求的pH,对培养箱工作的C02浓度要求也不一致。详细了解授精液、分裂期、囊胚培养液、移植液及洗精等不同用途的培养液对血清白蛋白添加量的要求,一些试剂本身含有白蛋白,不需要添加;同时不同白蛋白产品对同一培养液的添加量也不同。对不同存储要求的试剂根据存储要求分类存放,同一类试剂根据不同的有效期,按最先过期的试剂放置在容易拿取的位置,优先使用,并及时淘汰过期试剂。严禁不同生产批次的试剂和不向用途的试剂混合存放。


  对培养液的采购、存放、使用、淘汰做必要的登记是非常重要的,坤和首先应该对医院的采购流程、试剂采购周期、某段时间内试剂的可能消耗量做一个合理的预测。并建立行之有效的试剂采购使用登记记录,专人负责。记录内容应包括商品名、生产商、经销商、订购数量、单价、包装规格,订购人员,试剂到货后应该记录到货日期、数量、有效期、收货人,并对特殊情况进行备注。参照试剂说明书,将试剂分别冷冻或冷藏保存。根据实验室的工作量定期检查培养基的使用情况,根据供货商的供货周期及医院采购情况预定下—一阶段试剂的需求量,合理补充。


  对使用量较少的试剂,建议在初次使用时进行分装处理,分装的量可根据每次该试剂的使用量而定,一次一支。分装后的试剂封口膜密封处理,并标记分装日期,周期数较少,使用时间可能很长的试剂也可将过期日期标注在分装的离心管上,避免使用过期试剂。切忌在配液过程中将试剂反复升温—降温。


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